发展绿色食品是解决优质农产品不充分不平衡矛盾的有效途径，在将来的发展中，绿色食品地位和规模将会成为优质农产品标准化生产的最主要的组成部分，具有广阔的发展前景，同时对《绿色食品农药使用准则》的要求也会越来越高。

通过分析，可以得到三种浓度的氯酸盐标准溶液相对标准偏差分别为0.42%、0.51%、0.69%，并发现精密度与精准度较高，能对饮用水中的常规阴离子进行有效测定与分析，能满足实际需求。相关链接：氯酸盐，水样，标准溶液。

2.2准确度和精密度分析分别选取为低、中、高浓度的氯酸盐标准溶液进行6次平行测定，其相对标准偏差分别为0.42%、0.51%、0.69%，结果见表3（取部分数据）样品进离子色谱仪均经过0.2m微孔滤膜过滤。亚氯酸盐进入人体，会让人出现溶血性贫血等疾病，如果严重还会发生突变性，国际癌症研究中心（ARC）确定亚氯酸盐与溴酸盐为致癌物，且溴酸盐达到2B级。1.2实验目的(1）建立了一种测定水中氯酸盐的离子色谱方法。1.4试剂氯酸盐标准溶液SB05-223-2008，浓度为1000mg/L，农业部环境保护科研监测所。

1.5色谱条件色谱条件具体见表1。水中氯酸盐含量利用离子色谱方法进行测量取得了良好的效果，以ECGⅢKOH在线淋洗液，DionexIonPacAS19阴离子交换柱，等度测量。以绿茶样品的滋味指标为自变量，各消费者的喜好评分为因变量，建立起滋味特征对消费者评分的外部偏好图。

从这4个滋味属性对消费者偏好的贡献中得知，苦度和涩度浓度均与消费者偏好评分呈极显著负相关，醇度则与消费者偏好评分呈极显著正相关，表明这4个滋味属性对消费者评价的贡献较大，且它们之间相互影响。苦度、浓度和醇度是影响消费者偏好的主要因素，其中苦度、浓度对消费者偏好为显著负向影响，醇度对消费者偏好为显著正向影响。类别2和类别3位于图4中的左上方，距离最近的滋味特征是回甘度，说明类别2、3偏好较高水平的回甘强度，其中类别2附近有较密集的样品，而类别3附近的样品较少，说明大部分样品受到了第2类消费者的喜欢，类别2相较于类别3距离回甘较远，处于回甘与醇度、鲜度和甜度的中间位置，对这几种滋味指标的均衡性有一定要求。类别1位于图4中的左下角，距离醇度、鲜度和甜度较近，说明类别1的消费者偏好的滋味特征包括醇度、鲜度、甜度，主要偏好的样品是P3。

外部偏好图是一种将样品的感官描述性分析结果与消费者测试数据相结合的技术，通过PLSR建立样品的感官特征与消费者评分之间的关系。利用主成分分析对消费者数据形成偏好图。

由图4可知，消费者被划分成3类，类别1、2和3的偏好方向基本一致，主要集中在PC1的左侧，样品的滋味特征表现为较高水平的甜度、鲜度、醇度和回甘度。位于中间区域的大部分样品偏向PCI右侧，仍是消费者不喜欢的样品，但消费者的不喜欢程度相较于最右侧的样品低。同时，这也与YAU等的研究结果相近，表明苦度和浓度是降低消费者评分的主要因素。对20个绿茶样品的消费者偏好映射和PLSR分析结果表明，消费者偏好苦度、涩度和浓度较低，且鲜度、甜度、醇度和回甘度较高的绿茶样品。

相反，消费者喜欢的样品是P3、P6、P16、P17、P19和P20，其中P3与该类其他样品距离较远，说明该样品与其他样品相比有一定的差异性，这与该样品的实际情况相符。由图3可知，消费者对样品的喜好程度大致可以分为3类，以PCI轴为界限，样品P1、P2、P5、P7、P9、P12和P13位于PCI的最右侧，与消费者偏好方向相反，说明这类样品没有受到消费者的喜欢，甚至是消费者有点讨厌的样品，这类样品中P1与其他样品分离，靠近PCI轴，说明消费者对该样品的喜好程度相较于其他样品高公式(6)用于计算每微升质粒DNA和基因组DNA(gDNA)的拷贝数。根据qPCR结果生成pDNA和gDNA的五点标准曲线。

按照公式(4)计算参考物质的标准不确定度：计算扩展不确定度时，应将标准不确定度乘以包含因子(k,k=2)。PCR程序：95℃预变性10 min,95℃变性30 s,55℃退火45 s进行40个循环。

所以，扩展相对不确定度计按公式(5)计算：1.2.6 qPCR试验分别对pDNA和从Listeria:H7标准菌株中提取的gDNA通过A260进行定量。1.3统计学分析使用SPSS 16.0和Graphpad 5.0软件进行统计分析。

pDNA的不确定度由三部分组成，分别是：由于分装过程中不均匀性引入的不确定度(uh)、长期保存引入的不确定度(us)、定值过程引入的不确定度(uq)。均匀性测试使用单向方差分析。qPCR分析使用ABI SYBR FAST qPCR Master Mix(2),在八联管中以25L体积进行PCR反应(引物序列和扩增子大小见表1),每个反应均含10 pmol/L引物。稳定性分析使用单向线性回归分析来计算斜率1,当|1|。根据单增李斯特菌基因组大小2.90 Mbp估算gDNA的拷贝数，并基于4 271 bp估算pDNA Listeria的拷贝数。进而参考ISO指南35,根据公式(3)计算质粒DNA在定值过程引入的不确定度(uq):其中：s为总平均值的标准偏差，p为实验室数目。

定量完成后，分别使用2106～2101拷贝/L的pDNA Listeria和gDNA制备10倍稀释系列浓度样品用于进行qPCR检测。1.2.5 pDNA的定值与不确定度分析pDNA Listeria的特性值由8个不同的实验室用UV方法协同测定，检测结果通过统计检查以确认每组数据没有异常值和显著差异后，将8个实验室的结果平均值作为该pDNA标准品的特性值

均匀性测试使用单向方差分析。1.2.5 pDNA的定值与不确定度分析pDNA Listeria的特性值由8个不同的实验室用UV方法协同测定，检测结果通过统计检查以确认每组数据没有异常值和显著差异后，将8个实验室的结果平均值作为该pDNA标准品的特性值。

pDNA的不确定度由三部分组成，分别是：由于分装过程中不均匀性引入的不确定度(uh)、长期保存引入的不确定度(us)、定值过程引入的不确定度(uq)。所以，扩展相对不确定度计按公式(5)计算：1.2.6 qPCR试验分别对pDNA和从Listeria:H7标准菌株中提取的gDNA通过A260进行定量。

PCR程序：95℃预变性10 min,95℃变性30 s,55℃退火45 s进行40个循环。稳定性分析使用单向线性回归分析来计算斜率1,当|1|。进而参考ISO指南35,根据公式(3)计算质粒DNA在定值过程引入的不确定度(uq):其中：s为总平均值的标准偏差，p为实验室数目。1.3统计学分析使用SPSS 16.0和Graphpad 5.0软件进行统计分析。

根据qPCR结果生成pDNA和gDNA的五点标准曲线。根据单增李斯特菌基因组大小2.90 Mbp估算gDNA的拷贝数，并基于4 271 bp估算pDNA Listeria的拷贝数。

按照公式(4)计算参考物质的标准不确定度：计算扩展不确定度时，应将标准不确定度乘以包含因子(k,k=2)。公式(6)用于计算每微升质粒DNA和基因组DNA(gDNA)的拷贝数。

qPCR分析使用ABI SYBR FAST qPCR Master Mix(2),在八联管中以25L体积进行PCR反应(引物序列和扩增子大小见表1),每个反应均含10 pmol/L引物。定量完成后，分别使用2106～2101拷贝/L的pDNA Listeria和gDNA制备10倍稀释系列浓度样品用于进行qPCR检测

分别选择4、-20、-70℃UV法进行短期稳定性(6个月)试验，56℃(2个月)进行极端温度试验，温度-20℃作为制备的质粒标准物质的特定储存条件进行长期稳定性试验(每月UV法检测一次，一共检测12个月)。目前单增李斯特菌的实验室检测已经从微生物学检测转向核酸检测。质粒DNA参考品在实时荧光PCR检测中的适用性证明，可以保证实时定量PCR检测结果与单增李斯特菌基因组DNA参考品具有可比性。1.2方法1.2.1片段设计和克隆根据单增李斯特菌检测的hlyA(GenBank:KC770796.1)、plcB(GenBank:JF712529.1)、inlA(GenBank:EF445938.1)基因序列人工合成一段基因作为检测靶标片段。

基因组DNA作为参考品，难以同时为多个靶标提供可溯源的定量参考。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。

但是作为PCR检测方法相应的核酸参考品目前十分缺乏。ABI SYBR FAST qPCR Master Mix(2)(英国New England Biolabs)。

1材料与方法1.1主要仪器与试剂单增李斯特菌标准菌株(ATCC 19115),由广州海关检验检疫中心保存。方法设计一种质粒DNA包含目前常用于单增李斯特菌检测的hlyA、plcB、inlA基因，并对其稳定性、均匀性和量值可追溯性进行评价。